【动保课堂】细菌培养——在划线过程中需要掌握的技术要点有哪些？

1、菌液稀释与单菌落形成：在划线过程中，接种物会随着划线动作逐渐稀释。通过合理控制划线的力度和速度，可以使菌液中的细胞逐渐分散，从而获得较多独立分布的单个细胞。这些单个细胞在适宜的培养条件下，经过生长繁殖，最终形成独立的单菌落。单菌落的形成是平板划线分离法的关键目标，它为后续的纯菌株筛选提供了基础。

2、划线技术与划线形状：不同的划线技术会导致不同的划线形状。常用的划线方法是三线法，这种方法操作相对简单，能够较好地实现菌液的稀释和单菌落的分离。然而，在一些特殊情况下，也可以采用四区划线法等其他划线方法。这些不同的划线方法各有优势，可以根据实验的具体需求和菌液的特性进行选择。

3、多次消毒与减少污染：在划线过程中，可多次对接种环进行烧灼消毒和冷却。通过这种方式，可以有效减少接种环上残留的有机物和其他微生物，从而降低污染的风险，提高获得纯菌落的概率。

4、培养皿盖子的处理：在整个划线过程中，培养皿盖子应尽量保持半开状态。这样既可以保证操作的便利性，又可以最大限度地减少外界污染物进入培养皿的可能性。培养皿盖子的正确处理对于保证实验的无菌性至关重要。

5、划线手法的控制：划线时，接种环与琼脂表面的接触是关键。接种环应始终与琼脂表面保持接触，但又不能用力过猛。特别是使用铁质接种环时，由于其硬度较高，很容易擦破琼脂表面，从而影响划线的效果。因此，在操作过程中，需要特别注意手法的轻柔，确保划线的均匀性和完整性。