细菌培养被广泛应用于生物化学与分子生物学的实验,例如基因克隆与表达、DNA与RNA的提取、酶的生产、细菌与细胞共培养等。下面总结分享几点实验过程中的注意事项:
(1)细菌培养要求所涉及的物品、操作均要求无菌,否则会存在其他杂菌的污染。
(2)灭菌之前注意按照菌的生长情况调节培养基的pH值例如LB培养基要求PH值在7.0~7.4之间,防止偏酸或者偏碱的环境影响菌的生长。
(3)培养基配置时,使用蒸馏水充分溶解;灭菌完成后,固体培养基可以暂放烘干箱后倒平板。
(4)抗生素、增菌液一定是等待培养基稍稍冷却至手可以正常触碰锥形时加入,否则抗生素会失效。
(5)所使用的的物品基本上放置在酒精灯的周围,例如倒平板时,灼烧瓶口后一手操作平板一手操作锥形瓶倒平板。

(6)为了防止平板产生水汽,可以将平板半敞开在酒精灯周围,也可以全部叠放在酒精灯的旁边。

(7)分枝杆菌生长周期长,需要按照说明书的比例加入增菌液、抗生素以及倒厚平板,保证长时间的培养有足够营养成分和良好的生长环境。
(8)鸟分枝杆菌属于非结核分枝杆菌,存在一定的感染性,使用前需要用60℃水浴灭活30min,同时在生物安全柜中进行操作,防止感染。
(9)在实验操作过程中,需佩戴好手套、口罩、穿好实验服等。
(10)平板处理,有一定感染性的平板需要集中灭菌处理后再丢弃。
(11)注意标记平板,一般标记好时间、菌种名称、培养条件等。
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