猪大肠杆菌病的实验室诊断方案（博维特-译稿）

细菌培养

活体分离。

样品类型：粪便、肠内容物。

优点:

o 细菌易在1天内完成培养。

o 任何实验室都易于做到（包括内部的）。

o 成本相对较低。

缺点：

o 一些大肠杆菌是肠道的正常菌群。

o 猪体内同时存在多种大肠杆菌。

o 以前用抗生素治疗过的猪会阻碍细菌生长。

药敏试验

测试活生物体在特定浓度的不同抗菌剂中的体外生长能力。

样品类型：粪便、肠内容物。

优点：

o 鉴定特定分离株对常见抗菌剂的敏感性或耐药性。

o 确定抗菌剂耐药性趋势。

缺点：

o 需要分离细菌。

o 体外测试结果可能与体内结果略有不同。

o 一些特定的抗菌剂可能不能被测试或需要单独的、特殊的测试方法。

o 中等成本。

组织病理学

评估是否存在组织病灶（损伤），从而确定是否存在疾病。有时也可以通过额外的特殊染色直接（细菌和寄生虫）或间接（病原）检测生物体的存在。

样品类型：组织。

优点：

o 将细菌与肠道损伤联系起来。

o 不需要特殊染色。

缺点：

o 需要在猪死亡后15min内用福尔马林固定肠道组织——肠道组织易腐败。

o 疾病存在节段性，因此应采集多个肠道样本。

基因分型

一种检测与已知毒力基因相关的核酸（DNA）特定序列的聚合酶链式反应（PCR）技术。

优点：

o 操作简单。

o 通过检测与毒力因子相关的基因（不需要表达基因）来帮助识别致病性。

o 有助于选择正确的疫苗（匹配正确的菌毛）。

缺点：

o 需要分离细菌。

o 希望正确的分离株被基因分型（猪可以同时有多个分离株）。

o 价格适中，但通常1次只检测1个分离株。

通过 PCR 基因分型检测的大肠杆菌基因及其功能

细菌培养

溶血性取决于猪的年龄：

o 断奶前：非溶血性大肠杆菌。

o 断奶后：溶血性大肠杆菌。

纯度：

o 纯净生长：表明是致病因子的可能性很高。

o 混合生长：可疑菌株。

数量：

o 多：表明是致病因子的可能性很高。

o 中度：多种可能。

o 少：可疑（可能被污染）。

o 无：患病猪只先前可能用抗生素治疗过，或该菌株不是关键致病因子。

药敏试验

易感：如果抗菌药物能到达目标组织，则可能是治疗的好选择。

耐药：选择不同的抗菌剂。

MIC（最低抑菌浓度）：如果做MIC测试，确保所选抗菌剂在目标器官中达到列出的MIC值。

组织病理学

阳性：如果能够证明大肠杆菌粘附于上皮细胞的肠道病变，则与指控的疾病有很强的关联。

阴性：无肠道病变。

基因分型

基因分型对于确定分离的大肠杆菌是否包含毒力因子（能证明该分离株是致病的）非常有价值。

患有腹泻的猪（任何年龄）

收集2头或多头未经治疗的腹泻猪的直肠拭子，并进行细菌培养、药敏试验和基因分型。

安乐死1-3头未经治疗的腹泻的仔猪。立即收集每头仔猪的3个肠道样本并将其放入福尔马林溶液中。收集新鲜肠道样本，冷藏运送用于细菌培养、药敏试验和基因分型。

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