非洲猪瘟(ASF)是一种极具传染性的病毒性疾病,给养猪业带来了严峻的挑战。除了直接威胁生猪外,环境中的非洲猪瘟病毒核酸也可能成为潜在的传播源,增加疫情复发的风险。因此,清除环境中的病毒核酸显得尤为重要。本文将深入探讨有效的方法和策略,帮助养殖者进行消毒和清理,确保猪场的生物安全,为养猪业的可持续发展提供坚实保障。
  如果猪场外围生物安全体系存在漏洞,环境、人员及用具则存在被非洲猪瘟病毒污染的可能性。因此,需定期对可疑区域、人员及用具进行采样,检测非洲猪瘟病毒核酸,以评估猪场污染程度并采取应对措施。目前最常用的检测方法是实时荧光定量PCR(QPCR)。通过QPCR检测出环境中存在非洲猪瘟核酸,表明该区域曾被非洲猪瘟病毒污染过,但并不能确定病毒是否具有感染力。验证污染区中病毒是否具有感染力只能在专业实验室中进行。因此,生产中养殖户通常以非洲猪瘟核酸阴性来判断环境中是否安全。
  常见的清除核酸的方法包括消毒剂裂解、紫外线照射、高压灭菌等。针对气溶胶中的核酸污染,还可以使用环氧乙烷熏蒸和加强通风等方法。研究表明,氯消毒剂对多种病毒核酸有较好的裂解作用。烧碱对RNA病毒核酸有较强的裂解能力,但对DNA病毒核酸裂解能力较弱。对于非洲猪瘟病毒核酸,裂解能力较强的消毒剂主要有二氯异氰尿酸钠与三氯异氰尿酸钠,其次是二氧化氯与过硫酸氢钾。戊二醛在高浓度下有一定裂解核酸的作用,而月苄三甲氯铵、过氧乙酸、癸甲溴铵、碘与酚等消毒剂裂解核酸能力较弱。
  1. 冲刷法
冲刷法是通过用水冲刷的方式让病毒从表面脱离。由于非洲猪瘟病毒通常仅在环境、人员及物品表面上粘附,并未侵入内部,因此用水冲刷很容易清除病毒核酸。低压水冲刷方式可以减少污染物扩散的可能性,且冲刷前宜先用消毒剂将非洲猪瘟病毒灭活。用水冲刷不仅可以清除非洲猪瘟病毒,还可让绝大多数其他污染原随水流冲走,从而降低猪群染病概率。例如,猪场员工淋浴更衣后再进生产区可明显降低猪群染病概率。若人员身上QPCR检测结果呈阳性,全身用沐浴用品搓洗两遍,再用水冲全身10分钟,能冲刷掉身上携带的病毒,使QPCR检测结果呈阴性。
  2. 火焰灼烧法+氯制剂裂解法
火焰灼烧法和氯制剂裂解法相结合是另一种有效的清除核酸的方法。
2.1 原理
使用此方法清除核酸时,应先将物体表面清洗干净。核酸可用火焰灼烧方法烧毁,也可以使用消毒剂破坏结构使其失活。次氯酸离子可以与核苷酸的含氮碱基反应破坏其结构,或者通过芬顿反应将DNA氧化,最终达到清除的目的。
2.2 应用
2.2.1 火焰灼烧法
依次对清洗干净的定位栏采样,用QPCR检测非洲猪瘟病毒核酸的结果有3处栏杆呈阳性,CT值在36~38。用液化气喷枪火焰在这3处栏杆表面灼烧3秒,冷却后再次采样,检测结果均转为阴性。此法多用于清除被污染的金属制品、水泥地等可耐高温物体。
2.2.2 氯制剂裂解法
二氯异氰尿酸钠加水稀释成含有效氯0.12%~0.15%的溶液,浸泡裂解核酸效果最好。通常QPCR检测结果CT值在30以上的污染物在此溶液中浸泡30分钟,再次采样用QPCR检测结果可变成阴性。若被污染物体积太大无法浸泡,则可用配置好的消毒液对污染物喷淋至表面液体流动来裂解核酸,每隔10分钟喷淋1遍,通常喷3~5遍后再次采样,检测结果可变成阴性。此外,含有效氯40%的三氯异氰尿酸钠烟熏剂或含有效氯45%的二氯异氰尿酸钠与葡萄糖粉混合配成烟熏剂,在密闭空间内点燃重蒸12小时,也可有效清除核酸。
  总结
栏舍洗消后,养殖户通常会在进猪之前对疑似污染区域采样,用QPCR方法检测是否存在非洲猪瘟病毒核酸,只有检测结果呈阴性才放心进猪饲养。若检测结果出现阳性,采用文中叙述的方法能很快将污染区残留的非洲猪瘟病毒核酸清除,缩短养殖户空栏时间。虽然以上方法能有效清除环境中的非洲猪瘟病毒核酸,但养殖户的防控重心还是应该放在封堵生物安全漏洞上,防止病毒侵入才是根本。


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