【动保课堂】细菌培养-平板划线培养法

平板划线分离法是一种经典的微生物纯化技术，广泛应用于细菌培养的实验过程中，其重要核心不走如下：

1、接种环消毒：在操作开始前，将接种环置于火焰上灼烧数秒，确保其表面达到高温消毒状态，以消灭可能残留的微生物，为后续的无菌操作奠定基础。

2、冷却接种环：将灼烧后的接种环在空气中停留数秒，使其自然冷却至适宜温度。这一步骤至关重要，因为过热的接种环可能会烫伤菌体细胞，影响其活性和后续的生长繁殖。

3、蘸取菌液：将冷却后的接种环轻轻浸入含有菌液的样品中，蘸取适量的样品。蘸取时需注意动作轻柔，避免搅动菌液，以免影响菌液的均匀性。

4、初步划线：将蘸有菌液的接种环在平板边缘轻轻涂抹，使菌液均匀分布。在此过程中，培养皿盖子应尽量保持半开状态，仅留出足够进行划线操作的缝隙，以防止外界空气中的有机物或微生物进入培养皿，造成污染。

5、再次消毒与划线：完成初步划线后，再次将接种环置于火焰上灼烧消毒并冷却。随后，按照预定的划线方法（如三线法、四区划线法等）在平板上进行划线。划线时，接种环应始终与琼脂表面保持接触，但需注意手法轻柔，避免用力过猛。特别是使用铁质接种环时，更要小心，因为其硬度较高，容易擦破琼脂表面，影响划线效果。

6、培养：划线完成后，将培养皿倒置放入培养箱中。根据所培养的微生物类型，设定适宜的温度，并等待一定时间，让菌落得以生长繁殖。