季节交替之际,是猪场流感(Swine influenza)爆发的高峰时期。猪场为控制猪流感,流调监测是必不可少的手段。猪流感(简称SIV)的采样和送检流程是确保样本质量、防止污染、保障实验室安全和得到有效检测结果的关键步骤。以下是常见流程。

一、 确定猪流感流调监测项目及样品类型

SIV流调监测可以检测SIV抗体也可以监测SIV病原。SIV抗体需要采集的样本是健康猪血清或发病猪血清样本。SIV病原需要采集的样本是猪鼻拭子。

二、 猪流感抗体监测

2.1 确定采样群体

调查猪群背景信息如:动物日龄、是否感染SIV、是否免疫SIV疫苗等。若为免疫猪群的抗体检测要标记清楚,未免疫的尽量采2-3胎的母猪和大的后备母猪;SIV发病场发病后至少15天以上猪的血清;无SIV疫病场可提供母猪血清样品。

2.2 确定采样数量

SIV发病场:每个场区的样品数量应为30份,每份血清不低于0.8ml。

无SIV疫病场:每个场区的样品数量应为20~50份,每份血清不低于0.8ml。

2.3 采样前准备

准备好个人防护用品和采样物品:消毒棉球、猪用一次性采血器、1.5mL离心管、标签、记号笔、记录表、冰袋等。

2.4 样品采集与保存

猪只血清采集通常选取颈部静脉或耳根静脉,其中以颈部静脉为主要采血部位。取出消毒棉球,在采血部位周围进行消毒。用采血针进行穿刺,注意角度和深度,同时保持手稳和力度适中。当血液进入采血管后,不要剧烈晃动,将采血器抽到最大量程,以便留出足够空间析出血清。采集到血液的采血管倾斜45度室内静置20-30分钟,使之凝结,放置到离心机上,进行离心分离。分离到的血清倒入1.5mL离心管中,做好标记。置于-15℃冷冻保存,然后低温保存运输。

2.5 血清样品的运输

将冻存好的待检血清样品,采用冷藏运输的方式运送至实验室。

三、 猪流感病原监测

3.1 确定采样猪群和数量

   出现意思症状的发病猪(72h以内);或与发病猪同栏猪的鼻拭子样本;疫后发病的也要采,以便筛选新的毒株。鼻拭子样本一般应不少于20份。

3.2采样前准备

人员防护用品、植绒棉签、鼻拭子保存管(内含样本保存液)、记号笔、自封袋等。(见下图)

3.3鼻拭子样品采集

辅助人员将猪保定,采样人员一手握住猪鼻梁将头部固定,另一手将棉签插入猪的一鼻孔中,深度约2~3cm,棉签头部全部进入鼻孔后旋转3~5圈。然后将同一根棉签,以同样方式插入另一鼻孔中旋转3~5圈。最后,将棉签头折断于准备的保存管中。装有鼻拭子的保存管用封口膜密封保存,并用记号笔做好标记,全部采集完后,将保存管装入自封袋。

3.4 鼻拭子保存与运输

需放入封口袋密封,放入带有冰块的泡沫箱中冷藏保存,尽快送至专业实验室进行检测评估。

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