猪君，非瘟抗原的检测试剂盒中有的会带有内源性内参，那么，这个内参有什么意义呢？简单来说，内源性内参是确保检测结果准确可靠的质检员；是试剂盒里预先配备好的、用于检测猪本身DNA的一套引物或探针，因为只要样本来自猪的组织或血液，就一定会含有猪的DNA，所以这套系统能全程监督整个检测流程是否正常；
一、内源性内参的两大核心作用
1 全程监控，避免假阴性
这是内参最关键的作用，它可以监控从样本采集到结果出炉的每一步是否出了问题：
样本质量监控：如果采样操作不规范，如拭子没沾到足够的口腔黏液、组织取样不准，导致样本里根本没有或只有极少量猪细胞，内参就会因无模板而扩增失败，这时结果无效，提示需要重新采样；
提取效率监控：如果核酸提取环节出了问题，如试剂失效、操作失误，导致DNA没提出来或降解了，内参同样会扩增失败，避免将真正的阳性样本误判为阴性；
反应抑制监控：有时样本中会带有抑制PCR反应的物质，比如肝素抗凝剂，导致扩增反应失败，内参的失败会直接暴露这个问题；
一句话总结：当病毒检测结果为阴性时，如果内参正常扩增，说明样品合格、提取成功、反应正常，阴性结果是可信的；
2 校准实验，保障结果有效
内参是所有样本，包括阴阳性对照的共同科目，是判断一次实验是否成立的先决条件；
实验有效性判定：如果样本的内参通道都没有出现正常的扩增曲线，那么无论病毒通道结果如何，本次实验都视为无效，必须重做；
排除假阳性干扰：内参在阴性对照中正常扩增，也证明了反应体系没有被污染；
二、如何正确使用
使用带内参的试剂盒，核心是看懂结果，请务必遵循以下三个步骤：
第一步：检查实验有效性
在分析任何样本结果前，必须先看质控品的结果是否满足试剂盒说明书的要求，以最常见的荧光定量PCR试剂盒为例（不同厂家可能略有差异，下同），一个有效的实验必须满足：
只有当阳性对照和阴性对照都满足以上条件时，本次实验才成立，可以开始分析样本结果；
第二步：看懂样本结果
对照试剂盒说明书（不同品牌阈值可能略有差异），根据病毒通道和内参通道的扩增情况，结果通常分为以下几种：
第三步：警惕内参不扩增
这是实际检测中最常遇到的问题，如果发现内参无信号，可以按以下顺序排查：
1 采样问题：样本中是否真的包含了猪的细胞？例如，用棉签在干燥的栏舍表面涂抹，可能没粘到任何生物样本；
2 提取问题：核酸提取过程是否出错？提取试剂是否失效？
3 抑制问题：样本是否使用了肝素钠作为抗凝剂？肝素是PCR的强抑制剂，请务必使用EDTA抗凝管采集血液；
4 操作问题：是否忘记在配液时加入内参探针？PCR仪程序是否设置正确？
三、小结
内源性内参虽然强大，但也有其局限性，它只能表明实验过程没问题，但不能完全替代严格的采样操作和实验室分区管理，防止假阳性和假阴性，仍然需要依靠规范的流程和严谨的操作。
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