一例猪腹泻PED强阳性样本导致的实验室微污染案例

摘要：

国测生物率先提出：导致猪场出现巨大损失但易被忽视，具有来源复杂、发生频率低、无规律、长期存在/累积特点，最终表现为实验室检测结果"假阳性”、造成决策者误判的污染情况，即为猪场“微污染”。

本文以湖北省黄冈市某猪场实验室猪流行性腹泻检测相关“微污染”事件为研究案例，梳理污染事件的背景与发生过程，分析核心污染问题及成因，并详细阐述针对性的现场处理方案与实施效果，最终提出实验室微污染的常态化预防机制，为畜牧养殖领域同类实验室的污染防控提供实践参考。

关键词：猪场实验室；微污染；PCR 检测；污染处理；防控机制

一、案例背景

本次研究案例为湖北省黄冈市某猪场实验室，该实验室于 2026 年 3 月出现猪流行性腹泻检测试剂盒污染问题，直接引发实验质控失败，客户初期初步判定为试剂盒本身存在质量问题。湖南国测生物技术人员接收到反馈后，通过微信、电话初步沟通，结合实验室检测操作常规，判断污染大概率由实验操作不当引发，为精准评估实验室污染现状、解决实际问题，技术人员第一时间赴实验室现场开展污染排查与处理工作。

图1：实验室污染腹泻试剂盒

经现场对实验室近期实验检测文件的梳理，发现污染事件发生前，该实验室检测出猪流行性腹泻强阳性样本，结合分子生物学检测的污染传播规律，初步判定强阳性样本的不当处理为本次实验室微污染的核心诱因，强阳性样本的核酸物质扩散至实验环境、实验器具及试剂盒中，最终造成试剂盒污染与实验质控失败。

二、核心问题及解决方案

1. 核心问题

本次猪场实验室微污染事件的核心问题可归纳为两方面，一是污染源明确但污染范围广，污染源为猪流行性腹泻强阳性样本，污染已扩散至实验室多个关键位点，包括样本前处理台面、洁净操作台、冰箱、PCR 仪及电脑、门把手、地面等，且部分位点检测呈现阳性；二是实验质控体系受影响，污染直接导致猪流行性腹泻检测试剂盒被污染，实验过程中阴性对照质控失败、多个检测样本结果无效，实验室常规检测工作无法正常开展，且客户初期未识别污染根源，易造成试剂盒的持续浪费。

同时，从污染溯源结果可发现，实验室存在消毒操作不规范、阳性样本处理后防护措施缺失等潜在问题，也是本次污染事件发生的重要辅助因素。

2. 针对性解决方案

为高效、彻底解决实验室微污染问题，技术人员制定了 “建立阴性检测环境→全面采样定位污染点→分类型消毒处理→二次采样验证效果” 的四步解决方案，全程依托分子生物学检测技术验证各环节处理效果，确保每一步操作的有效性。

• 建立阴性检测基础环境

为避免后续排查与消毒过程中试剂盒再次被污染，首先对实验室核心实验器具与环境进行初步清洁消毒：对移液器进行专项消毒、对洁净操作台全面消毒，更换全新的实验耗材；同时设置 4 个水提取对照实验，待检测结果均为阴性后，确认实验室已建立可开展有效检测的基础阴性环境，为后续污染点排查提供可靠条件。

• 全面采样评估，精准定位污染点

在阴性环境基础上，对实验室开展全维度采样，采样范围覆盖实验全流程的关键位点，包括样本操作台、离心机 / 涡旋仪、提取仪、洁净操作台、移液器 / 吸头盒、冰箱、PCR 仪及电脑、实验室门把手开关和地面。通过猪流行性腹泻专项检测，明确各位点的污染情况与 ct 值，精准定位污染区域与污染程度，为后续消毒方案制定提供数据支撑。

• 分类型制定消毒方案，规范实施消毒操作

根据实验器具与环境的材质、使用特性，制定“浸泡 + 擦拭”的差异化消毒方案：对可浸泡的实验器具（如移液器吸头盒、部分玻璃器皿等）采用浸泡消毒方式，对不可浸泡的实验设备、台面、地面、门把手等采用擦拭消毒方式。为确保消毒效果，对所有污染位点连续开展 4 次消毒操作，消毒完成后用清水对所有实验接触位点擦拭 1 遍，避免消毒水残留对后续 PCR 扩增反应产生抑制作用，影响检测结果。

• 二次采样评估，验证消毒处理效果

完成全流程消毒操作后，对实验室开展二次全面采样，采样位点与首次采样保持一致，包括样本处理台面、离心机 / 涡旋仪、提取仪、PCR 仪及电脑、洁净操作台、移液枪、冰箱、地面 / 开关 / 门把手等。经专项检测，所有采样位点检测结果均为阴性，表明本次消毒处理彻底解决了实验室微污染问题，实验室可恢复正常检测工作。

图7：二次采样评估

三、预防机制

本次黄冈市某猪场实验室微污染事件的处理，为畜牧养殖领域同类实验室的微污染防控积累了实践经验。结合分子生物学实验室污染防控的行业规范与本次案例的实际问题，从操作习惯、监测体系、废弃物处理、重点环节管控四个方面，提出实验室微污染的常态化预防机制，从源头降低污染发生概率。

1.培养标准化的实验室消毒操作习惯

消毒是实验室微污染防控的基础手段，实验室需建立全流程、高频次、标准化的消毒操作规范。实验前，对洁净操作台、移液器、实验台面等核心器具与环境进行消毒；实验过程中，对接触过样本尤其是阳性样本的器具及时进行局部消毒；实验结束后，对整个实验区域、实验设备、器具进行全面消毒，形成 “实验前 - 实验中 - 实验后” 的消毒闭环，杜绝核酸物质的残留与扩散。

2.建立实验室环境定期监测机制

依托分子生物学检测技术，建立实验室环境定期采样检测机制，明确采样周期、采样位点、检测指标与判定标准。定期对实验室样本操作台、PCR 仪、冰箱、洁净操作台等关键位点开展核酸采样检测，及时发现潜在的微污染问题，做到 “早发现、早处理”，避免微污染积累后引发试剂盒污染、质控失败等严重问题，保障实验室检测工作的连续性与准确性。

3. 规范阳性样本及扩增产物的废弃物无害化处理

强阳性样本及其扩增产物是实验室微污染的主要污染源，实验室需制定严格的阳性样本处理与废弃物无害化操作规范。检测完成后的强阳性样本、阳性扩增产物，需单独密封存放，与普通样本、耗材严格区分；实验废弃物（如吸头、离心管、擦拭纸巾等）需按照生物安全要求，进行高温灭菌等无害化处理后再统一丢弃，避免阳性核酸物质从废弃物中扩散至实验室环境，造成交叉污染。

4.强化实验室污染防控重点环节的专项管控

本次案例中发现，冰箱是实验室污染防控中易被遗漏的环节，实际检测中，冰箱作为样本与试剂的储存设备，若存在污染，极易造成样本与试剂的交叉污染，进而引发全流程检测问题。实验室需针对冰箱、PCR 仪、洁净操作台、移液器等污染防控重点环节与设备，制定专项管控措施，增加消毒与监测的频次；同时，对实验人员开展专项培训，提升其对重点环节污染防控的重视程度与操作能力，杜绝因操作疏忽引发的微污染问题。

结语：

畜牧养殖领域的实验室检测是疫病防控的重要技术支撑，检测结果的准确性直接关系到猪场的疫病防控决策。实验室微污染作为影响检测结果的重要因素，其防控与处理需遵循 “溯源精准、处理高效、预防为主” 的原则。本次湖北省黄冈市某猪场实验室微污染事件的处理，通过精准定位污染源、分类型实施消毒方案，彻底解决了污染问题；而基于案例总结的常态化预防机制，从操作、监测、废弃物处理、重点环节管控等方面形成了污染防控的闭环体系。

同类猪场实验室需以本次案例为参考，结合自身检测工作的实际情况，完善实验室污染防控管理制度与操作规范，强化实验人员的专业培训，将污染防控措施落实到实验全流程，从源头降低微污染发生概率，保障实验室检测工作的准确性与可靠性，为猪场疫病防控提供坚实的技术保障。