抑制饮水中大肠杆菌的最佳pH值是多少？

大肠埃希氏菌（E.coli）感染是断奶猪发病和死亡的主要原因。E.coli附着在肠细胞的微绒毛上，在那里定植、增殖、释放肠毒素，并导致液体分泌过多而引起腹泻。肠毒素会造成广泛的肠细胞损伤，从而减少水和电解质的吸收。肠上皮损伤可导致败血症、脱水和死亡。

由于多种药物治疗效果不佳，耐菌性E.coli的流行率越来越高，这已成为一个令人担忧的问题。一种替代治疗方法是对猪场的饮用水进行酸化处理，以减少和防止E.coli在肠道定植。先前的研究表明，当pH值在4到5之间时，E.coli最不容易定植。本研究的目的是确定抑制E.coli生长的理想pH值（pH值介于4和5之间），从而为养猪生产者提供一个pH值目标，以酸化水质，尽量减少猪E.coli感染。

材料和方法    

本研究分两个阶段完成。第一阶段确定培养基的目标pH值，同时防止污染。第二阶段量化培养基不同pH值下E.coli的生长情况。

第一阶段      

将88%的乳酸与无菌水按1:10稀释混合，作为原液。以0.025-1mL的递增向100毫升胰蛋白酶大豆肉汤（TSB）中加入该原液，直到pH值达到4.0、4.2、4.4、4.6、4.8和5.0，并使用pH计确认，pH值要求为±0.2精度递增。这一阶段重复两次，以确保准确性。

第二阶段      

在制备pH液和重复后，从临床病例中获得一个F18 E.coli菌株的菌落，将其放在接种环上，放入TSB中并搅拌。接种未添加原液的TSB作为阳性对照。TSB试验容器在37摄氏度下培养22小时。培养结束后，取出样品并稀释至1:1000、1:10000和1:100000。然后每种稀释液取0.5毫升均匀涂抹在5%牛血琼脂平板上。培养12小时后对平板进行评估。进行菌落计数和拍照，以量化和观察生长情况。

结   果      

pH值为4.20、4.40、4.60、4.80 和5.00的平板在所有稀释度下都有可量化和可视化的表面细菌生长。pH值为 4.00 的平板在所有稀释度下都没有可视或可量化的表面细菌生长（表1和图1）。

  结   论  

这项体外试验证明，E.coli的生长抑制点在pH值为4.0时，换句话说，如果pH值大于4.0，就会长细菌。在猪饮用水中添加酸化剂时，建议使用pH计进行检测，其精度要求为±0.2pH，而不是使用pH试纸。需要进一步开展体内研究，以了解猪在饮用pH值为4.0的水时肠腔的pH值，以及这是否会影响水和饲料的摄入量。