一、诊断技术:从传统到分子的精准化升级 禽腺病毒(FAdV)的诊断需结合临床症状、病理变化和实验室检测,形成 “三级筛查” 体系。 1. 临床与病理初筛 • 典型症状 : ◦ 心包积水 - 肝炎综合征(HHS) :由 FAdV-4 引起,肉鸡和青年蛋鸡突发死亡,心包积液呈淡黄色,肝脏肿大、出血或坏死。 ◦ 包涵体肝炎(IBH) :FAdV-8b、FAdV-11 等血清型导致,病鸡精神沉郁、排黄色稀便,肝脏出现灰白色坏死灶和核内包涵体。 ◦ 产蛋下降综合征(EDS) :FAdV-12(EDS-76 病毒)感染蛋鸡,产蛋率骤降 10%-50%,蛋壳变薄、畸形。 • 病理剖检 : ◦ 急性病例可见心包积液、肝脾肿大、肾脏出血;慢性病例表现为胸腺萎缩、法氏囊退化。 包涵体性肝炎:肝脏肿大,伴有出血灶。腺病毒性腺胃糜烂。来源:Natalia Majó博士,IRTA 2. 实验室确诊 • 病毒分离与鉴定 : ◦ 采集病鸡肝脏、脾脏或心包液,接种鸡胚肝细胞或 CEF 细胞,观察细胞病变(CPE)。FAdV-4 在鸡胚中可导致胚体蜷缩、出血。 ◦ 通过电镜观察病毒形态(无囊膜、二十面体对称),或利用血清中和试验(SN)、血凝试验(HA)进行血清型鉴定。 • 分子生物学检测 : ◦ PCR 与实时荧光定量 PCR :针对 Hexon、Fiber 等保守基因设计引物,灵敏度可达 10² 拷贝 /μL,适用于早期感染和混合感染检测。 ◦ 环介导等温扩增(LAMP) :如针对 FAdV-4 的 LAMP 试剂盒,30 分钟内完成检测,特异性达 100%,基层实验室可推广。 ◦ 基因测序 :对分离毒株进行全基因组测序,分析遗传进化关系,指导疫苗株选择。 • 血清学检测 : ◦ ELISA :检测血清中抗 FAdV 抗体,用于流行病学调查和免疫效果评估。 ◦ 中和试验 :测定血清对病毒的中和效价,评估疫苗保护力。
                
                
                
                
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