猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原监测是评估PRRSV感染动态的重要手段,而猪口腔液和血清样品是两种常用的检测材料。

本文将从采样方法、检测技术、应用场景、优缺点等方面,系统对比猪口腔液与血清样品在后备猪群PRRSV抗原监测中的应用,旨在为养猪从业者提供科学指导。

抗原监测的意义与方法


PRRSV是一种单股正链RNA病毒,主要感染肺泡巨噬细胞,导致呼吸道疾病和繁殖障碍。

一、后备猪群的PRRSV监测目的

早期发现感染:防止病毒传入种猪群。  

评估免疫状态:指导疫苗接种和净化策略。  

动态管理:掌握猪群健康状况,降低经济损失。

抗原监测通过检测病毒核酸(RNA)或蛋白,直接确认PRRSV的存在,较抗体检测更能反映当前感染状态。口腔液和血清是两种主流样品,各有其独特优势和局限性。

二、猪口腔液与血清样品的采样方法

1、猪口腔液采样  

方法:使用无菌棉绳或专用采样绳悬挂在猪舍内,后备猪通过咀嚼绳子分泌唾液。采样时间通常为20-30分钟,每根绳覆盖10-15头猪。  

处理:采样后将绳子置于无菌塑料袋中挤压,收集液体,4°C保存,24小时内送检。  

特点:非侵入性,群体采样,操作简便。

2、血清样品采样  

方法:通过耳静脉或颈静脉采血,每头猪采集2-5ml血液,使用无菌采血管(红头管)。采血后静置离心(3000rpm,10分钟),分离血清,4°C保存。  

处理:血清需冷链运输,48小时内检测。  

特点:侵入性,个体采样,技术要求较高。

三、采样方法对比  

一、常用检测技术  

实时荧光定量PCR(qPCR):检测PRRSV RNA,是抗原监测的金标准,适用于口腔液和血清。  

巢式PCR:提高灵敏度,用于低病毒载量样品。  

病毒分离:确认活病毒,耗时长,少用于常规监测。

二、灵敏度对比  

1、口腔液

检测PRRSV RNA的灵敏度略低于血清,因唾液中病毒浓度受排毒量和采样时间影响。  

研究表明,口腔液qPCR的检测下限约为10³-10⁴拷贝/mL。

2、血清  

血清中病毒载量较高(急性感染期可达10⁵-10⁷拷贝/mL),qPCR灵敏度更高,检测下限可达10²拷贝/mL。  

更适合检测个体急性感染。

3、特异性  

两者特异性均高(>95%),依赖引物设计和实验室条件。

三、检测技术与灵敏度对比

一、猪口腔液的应用  

1、应用场景:  

后备猪群的日常监测,评估群体PRRSV感染动态。  

大规模猪场的快速筛查,节省时间和成本。  

检测潜伏感染或低排毒期的病毒传播。

2、优点:  

非侵入性:减少猪只应激,避免采血引起的免疫下降。  

群体代表性:一次采样反映10-15头猪的感染状态,适合大群监测。  

成本低:每群采样成本约20-50元,远低于个体采血。

3、缺点:  

灵敏度有限:低病毒载量时可能漏检,假阴性率较高(5%-15%)。  

个体差异:无法精准定位感染猪只。  

采样一致性:猪只咀嚼行为不均影响结果。

二、血清样品的应用  

1、应用场景:  

后备猪群中疑似急性感染个体的确诊。  

新引进猪只的隔离检测,确保无PRRSV带毒。  

种猪群净化前的精准筛查。

2、优点:  

高灵敏度:检测急性感染和个体病毒载量更准确。  

个体化:可定位感染猪只,便于淘汰或隔离。  

全面性:可同时检测抗体和抗原,评估感染阶段。

3、缺点:  

侵入性:采血增加应激,可能诱发潜伏病毒激活。  

成本高:每头猪采样+检测成本约30-80元,大群监测费用高昂。  

耗时:采血和离心耗时,影响效率。

三、应用场景与优缺点对比

一、监测目标  

口腔液:适合评估后备猪群的整体PRRSV感染风险,监测潜伏或亚临床感染。  

血清:适合确认个体感染状态,尤其在新引进或疑似急性感染时。

二、频率与规模  

口腔液:每月1-2次群体监测,覆盖大群后备猪,成本效益高。  

血清:每季度抽检5%-10%猪只,或新猪引进时全检,精准但耗资大。

三、灵敏度与准确性  

口腔液:群体灵敏度较高(80%-90%),但个体漏检率约10%。  

血清:个体灵敏度达95%以上,假阴性率<5%。

四、应激与健康影响  

口腔液:无应激,适合频繁监测。  

血清:采血应激可能激活潜伏PRRSV,需谨慎操作。

五、后备猪群监测应用对比

六、防控建议

1、综合监测策略  

日常监测:使用口腔液定期筛查后备猪群,发现阳性后再用血清定位感染个体。  

新猪引进:隔离期间全群血清检测,确保无PRRSV带毒。

2、疫苗与管理  

接种PRRSV减毒活疫苗(如Ingelvac PRRS MLV),仔猪3周龄首免,后备期加强。  

保持猪舍通风,密度0.8-1.2平方米/头,减少应激。

3、实验室支持  

选择高灵敏度qPCR试剂盒,定期校准设备,确保结果准确。

猪口腔液和血清样品在后备猪群PRRSV抗原监测中各有优势:

1、口腔液适合群体筛查,成本低、无应激;

2、血清适合个体确诊,灵敏度高、精准。


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