在非洲猪瘟防控常态化大背景下,猪场中各种疾病的监测尤为重要。在猪群健康监测中,除了选择稳定性好、敏感性高、特异性强的检测试剂与检测方法以外,一线的样品采集技术也同样决定了检测结果能否反应真实状态。
1 、口腔液样品
1.1 适用对象
各阶段猪群皆适用,其中保育猪使用棉绳直径1cm;育肥、母猪、大栏后备等中大猪使用棉绳直径2cm。
1.2采样材料(采样数量N)
10mlEP管N只,1m长棉绳N+根(大栏采样多点悬挂3-5根棉绳),一次性PE手套3×N只(1只收集样品使用)、记号笔、隔离服、鞋套、一次性乳胶手套多副。每份样品的材料单独包装。
1.3采样时间
建议在早晨猪饲喂之前,若是自由采食,前一天晚上关闭料筒。采样前需断水半小时,大型栋舍内分区域、时段断水,母猪断水不超过2小时。
1.4采样方法
采样前戴一次手套,打开套装包装,将棉绳悬挂在栏内干净的区域内,并远离水槽、饲料槽;将绳股松开采样;调节棉绳至猪肩高度;将绳子系牢,栏内啃咬放置20-30分钟。
1.5唾液收集
戴一次性手套,将被啃咬的部分棉绳放入一次性PE手套中,捏紧拉扯棉绳,将口腔液挤入手套中;将所有口腔液收集到手套的一个手指处,揪下手指套后倒入离心管,做好标记。每收集一次棉绳,更换一次性PE手套,注意防止交叉污染,如污染到乳胶手套,需及时更换。注意:棉绳唾液收集过程要务必注意交叉污染的问题,建议两人合作。
1.6检测
口腔液样品收集后需及时检测,检测前先12000rpm/min离心5分钟去除口腔液中的杂质后,使用上清提取核酸检测。
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