猪只解剖和取样要求及注意事项

一、常规取样要求和材料

分子生物学样品可以选择取血液、唾液、肺、淋巴结、小肠等。微生物学样品可以选择取脑、肺、小肠等。病理组织样品可以选择取心、肝、脾、肺、肾、大脑、小脑、十二指肠、空肠、回肠、淋巴结，结肠。

材料：刀（不要用手术刀片）、剪刀、镊子、无菌保鲜袋、10%福尔马林溶液或者75%的酒精，打火机

可以用肺组织检测各种病毒，包括蓝耳、伪狂犬病毒等，同时要根据临床表现取肺做细菌培养，注意细菌培养的组织要取正常组织与病变组织交界处，最好选择没有经过临床治疗的猪。取固定组织的时候肺组织大小如上面右图（成人指甲盖大小），病理组织需要取尖叶、心叶、膈叶，位置点取三个以上。

在不做详细的分子生物学，微生物等检测的时候，对肺的大体观察需要象上图一样平铺，背面朝上，肺大体观察最重要的标志是看肺能否塌陷褶皱，肺是否能够塌陷，可以大致衡量肺泡形态正常与否。

取脑做细菌培养或者病理组织，如果怀疑PRV可以用脑做PCR，如不需要做细菌培养和PCR的时候，只取固样品的时候，取样一定要包括大脑，用大脑可以观察是否存在化脓性脑炎或者非化脓性脑炎，这对于判断猪群当下的主要问题是什么会非常有意义。

取心、肝、脾、肺、肾、淋巴结、淋巴结，可以选择腹股沟淋巴结或者肺门淋巴结作为病理组织，这些组织的体积可以在成人指甲盖大小，取多种组织做组织病理学是必要的，尤其是在面临一些复杂的问题时候。在大多数情况下不需要取心脏、肝脏、脾脏、淋巴结、肾脏做细菌培养，只有在怀疑败血性沙门氏菌或者诺维氏梭菌（母猪）的时候可以用肝脏做培养。

可以选择空肠或者回肠，做PCR测病毒性肠炎，如流行性腹泻病毒、轮状病毒等，取空肠或者回肠长度在10厘米左右做肠道细菌培养，细菌培养的组织并不需要两头扎起来，取十二指肠、空肠、回肠每段1-2厘米左右做病理组织，当怀疑沙门氏菌时候可以取结肠组织。病理组织需要冲洗肠道内容物，用75%的酒精或者福尔马林溶液进行清洗

猪腹泻相关疾病主要病原分布和损伤特点（图片来自于曲博士猪群健康管理）

二、检测项目：

                       宏基因组测序

组织病理切片

可以根据现场的实际情况选择各种合适的检查方式，如分子生物学、微生物学、病理学检查。

正确的诊断方法是控制疾病的基础。诊断途径需要适当的采样，以分离或证明病原体，评估特征性显微镜病变以及观察的显微镜病变内特定抗原的共定位。

因此，诊断方法必须考虑病原体的生物学和生态学、检测病原体的解剖位置以及可用且适当的诊断工具，以证明病原体与患病状态之间的相关性。

在多数情况下，仅分离到病原体并不意味着正确诊断，只有在严格遵循疾病定义的诊断标准才有可能得出准确的结论。

三、注意事项：

1、取样顺序先后为先取细菌培养组织，如脑和肺、小肠，然后取PCR组织，如肺和小肠、最后取病理组织。

2、细菌培养的组织，要单独放入无菌保鲜袋，如肺单独放进无菌保鲜袋，里面不能有其他组织，肠道需要取空肠或者回肠，不需要把整个肠道放入无菌保鲜袋。

3、病理组织中，肠道需要用75%的酒精或者福尔马林溶液清洗肠道内容物，这点很重要，并且肠道组织不能太长，长度在1-2厘米。

4、解剖猪一定要取脑组织，特别是病理组织，细菌培养的组织要挑选那些近期没有经过治疗的。

5、解剖取样要两到三个人完成，其中一个人重点负责拍照，尤其对一些组织，如肺、肠道必须要拍照，对组织的宏观病变的详细分析是非常必要的。

6、最佳的固定液为10%的福尔马林，如果现场没有福尔马林可选75%的酒精。